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小鼠蛋白激酶B(PKB)酶聯免疫elisa試劑盒規格

小鼠蛋白激酶B(PKB)酶聯免疫elisa試劑盒規格

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小鼠蛋白激酶B(PKB)酶聯免疫elisa試劑盒規格 詳細資料

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產品名稱:小鼠蛋白激酶B(PKB)酶聯免疫elisa試劑盒規格
英文名稱: PKB ELISA Kit
規格:96T/48T
存儲條件:2-8℃
有效期:6個月
特異性:本ELISA檢測試劑盒可同時檢測天然或重組的,且與其他相關蛋白無交叉反應。
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床 。

小鼠蛋白激酶B(PKB)酶聯免疫elisa試劑盒規格類型和操作步驟
ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑:
①固相的抗原或抗體,
②酶標記的抗原或抗體,
③酶作用的底物。根據試劑的來源和標本的性狀以及檢測的具備條件,可設計出各種不同類型的檢測方法。
(一)雙抗體夾心法、
(二)一步法、
(三)間接法測抗體、
(四)競爭法。
小鼠蛋白激酶B(PKB)酶聯免疫elisa試劑盒規格標本要求
.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可向客服索取說明書》》 在線索取
2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品0μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘。
0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后5分鐘以內進行。
小鼠蛋白激酶B(PKB)酶聯免疫elisa試劑盒規格技術流程:
一、雙抗體夾心法(檢測未知抗原)
、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應孔中加0.ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~小時,洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。
二、間接法(檢測未知抗體)
、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
3、加酶標抗體:于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。

ONPG 干粉    g    
液相內毒素清除劑    00 次    
RNase-free Tris HCl,M,pH 7.5    00mL    
間充質干細胞生長因子 - 無血淸    5mL    
20403-300    蝦堿性磷酸酶    300U
CAS8795-38-6    藍色葡聚糖 2000    g
23-0670-50    S-Methyl-ITU.sulfate(iN0S 抑制劑 )    50mg
00884-2.5    IPTG 干粉    2.5g
D- 果糖 -6- 磷酸二    00mg    
3- 苯甲酰丙酸    5g    
PDTC(NF-κB 抑制劑 / 抗氧化劑 )    g    
人重組 AP(c-Jun)    50fpu    
人源脫嘌呤 / 脫嘧啶 (AP) 核酸內切酶激酶    000U    
動物細胞裂解液 A    50mL    
山羊抗小鼠 IgG(H+L),異硫氰酸熒光素標記    000 μL   對三氟腈    分子式:    7.2    分子量:    C8H4F3    英文名稱:    Tothreef    :    455-8-5
對三聯    分子式:    230.3    分子量:    C8H4    英文名稱:    Tothree    :    92-94-4
對叔丁甲(PTBT)    分子式:    48.24    分子量:    CH6    英文名稱:    Paratertbutyltoluene(PTBT)    :    98-5-
對叔丁甲酰    分子式:    92.26    分子量:    CH6N2O    英文名稱:    Tertbutylphenylhydrazine    :    4300-38-5
對叔丁氯    分子式:    68.66    分子量:    C0H3CL    英文名稱:    Paratertbutylchloride    :    3972-56-3
對四聯    分子式:    306.4    分子量:    C24H8    英文名稱:    P-quaterphenyl    :    35-70-6
對位紅    英文名稱:    ParaRed    :    640/0/2    分子式:    293.28    分子量:    C6HN3O3
對五聯    分子式:    382.5    分子量:    C30H22    英文名稱:    Tofive    :    3073-05-0
對香豆    英文名稱:    Forsweetbeanacid    :    50-98-4    分子式:    64.5802    分子量:    C9H8O3
小鼠蛋白激酶B(PKB)酶聯免疫elisa試劑盒規格對香豆    英文名稱:    Forsweetbeanacid    :    50-98-4    分子式:    64.5802    分子量:    C9H8O3
對硝碘    分子式:    249.0    分子量:    C6H4INO2    英文名稱:    Onm-nitroiodobenzene    :    636-98-6
對硝磺酰    分子式:    22.62    分子量:    C6H4ClNO4S    英文名稱:    Nitrophenylsulfonylchloride    :    98-74-8
對硝甲    英文名稱:    Paranitrotoluene    :    99-99-0    分子式:    37.4    分子量:    C7H7NO2 

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