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小鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格

小鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格

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小鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格 詳細(xì)資料

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產(chǎn)品名稱:小鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格
英文名稱: CRF ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
存儲條件:2-8℃
有效期:6個月
特異性:本ELISA檢測試劑盒可同時檢測天然或重組的,且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床 。

小鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格類型和操作步驟
ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑:
①固相的抗原或抗體,
②酶標(biāo)記的抗原或抗體,
③酶作用的底物。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的性狀以及檢測的具備條件,可設(shè)計出各種不同類型的檢測方法。
(一)雙抗體夾心法、
(二)一步法、
(三)間接法測抗體、
(四)競爭法。
小鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格標(biāo)本要求
.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可向客服索取說明書》》 在線索取
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品0μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘。
0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后5分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
小鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格技術(shù)流程:
一、雙抗體夾心法(檢測未知抗原)
、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~小時,洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。
二、間接法(檢測未知抗體)
、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
3、加酶標(biāo)抗體:于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。

光甘草定    英文名稱:    Lightlicorice    :    59870-68-7    分子式:    324.37    分子量:    C20H20O4
廣藿香提取物    英文名稱:    Patchouliextract    :        分子式:        分子量:    
硅氟唑    分子式:    293.4    分子量:    C4H20FN3OSi    英文名稱:    Siliconfluoride    :    49508-90-7
硅膠擔(dān)體    英文名稱:    Silicagel    :        分子式:        分子量:    SiO2•nH2O
硅酸鉀    分子式:    54.28(以無水計)    分子量:    K2SiO3·nH2O    英文名稱:    Potassiumsilicate    :    32-76-
硅酸鋁    分子式:    282.2    分子量:    3Al2O3·2SiO2    英文名稱:    Aluminiumsilicate    :    302-93-8
硅烷0白擔(dān)體/硅烷02白擔(dān)體/硅烷202紅擔(dān)體    英文名稱:    Silane0white/silane/silane02white/silane/silane202    :        分子式:        分子量:    
癸二酸二酰    分子式:    230.3    分子量:    C0H22N4O2    英文名稱:    Twosebacicacidhydrazide    :    25-83-7
癸二酰    分子式:    230.3    分子量:    C0H22N4O2    英文名稱:    Decyltwohydrazide    :    925-83-7
桂皮醛    英文名稱:    Cinnamaldehyde    :    437-0-9    分子式:    32.6    分子量:    C9H8O
桂皮醛    英文名稱:    Cinnamaldehyde    :    437-0-9    分子式:    32.6    分子量:    C9H8O
過硫酸鉀    分子式:    270.32    分子量:    K2S2O8    英文名稱:    Potassiumpotassiumsulfate    :    7727-2-
過氧二異丙    分子式:    270.37    分子量:    C8H22O2    英文名稱:    Overtwoofcumeneoxidation    :    80-43-3
過氧甲酰    分子式:    242.23    分子量:    C4H0O4;(C6H5CO)    英文名稱:    Benzoylperoxide    :    94-36-0
過氧鉀    分子式:    7.    分子量:    KO2    英文名稱:    Potassiumperoxide    :    2030-88-5
過氧羥異丙    分子式:    52.9    分子量:    C9H2O2    英文名稱:    Cumenehydroperoxide    :    80-5-9單細(xì)胞裂解液 (DNA)    mL    
醛基磁珠    2mL    
電泳 TEMED    .5mL    
    2mg    
即用型高保真 PCR 試劑盒    9mL    
甜菜堿鹽    00g    
小鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格TB 感受態(tài)細(xì)胞    0×00μL    
氯化鋰 ( 無水 )    00g    
多聚甲醛 - 磷酸緩沖固定液    250 mL    
Origami(DE3)plysS 菌種    mL    
20653C-5    填入法 DNA 末端標(biāo)記試劑盒 C    5次
組蛋白    25g    
胎牛血清(北美特)    500mL    
30957-00    免 RNA 提取 RT-PCR 試劑盒     00 次
20307-000    SP6 RNA 聚合酶    000U

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